最近對SARS-CoV-2相關蛋白的結構表征證明了冷凍電鏡的無限潛力。在病毒爆發(fā)后的幾個月內,利用冷凍電鏡可以極快的速度解析了刺突蛋白的幾種構象,以及它與人源血管緊張素轉換酶或許多中和人源抗體片段的復合物的結構。最近獲得FDA批準的用于治療再利用藥物瑞德西韋(Remdesivir)與SARS-CoV-2 RNA聚合酶結合的結構也已被冷凍電鏡解析。鑒于X射線晶體學一直是病毒RNA聚合酶結構測定的傳統(tǒng)方法,對病毒冷凍電鏡結構解析是一個創(chuàng)新,凸顯了冷凍電鏡的高時效性特點在快速反應研究中的應用。
一:快速解讀冷凍電鏡
自增壓液氮罐
冷凍電鏡技術的基本原理是將生物大分子溶液置于電鏡載網上形成一層非常薄的水膜,然后利用液氮罐快速冷凍技術將其瞬間冷凍至液氮溫度下。冷凍速度非???,以至于水膜無法形成晶體,而是形成一層玻璃態(tài)的冰。生物大分子就被固定在這層薄冰里。將這樣的冷凍樣品保持低溫放置在透射電子顯微鏡下觀察,從而獲得生物大分子的結構,被稱為冷凍電鏡技術。
冷凍電子顯微學解析生物大分子及細胞結構的核心是透射電鏡成像,其基本過程包括樣品制備、透射電鏡成像、圖像處理及結構解析等幾個基本步驟。
液氮罐在整個過程中,起到了快速冷凍樣本,讓樣本保持在“活"著的狀態(tài),全程需要“冷鏈"運輸,包括樣品轉移到顯微鏡的過程。自增壓液氮罐的液氮供也是一路提供。
我司是專業(yè)提供自增壓液氮罐,CX100液氮罐,為賽默飛冷凍電子顯微鏡(Cryo-EM),日本日立匹配使用。
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